LABORATÓRIO DE FISIOPATOLOGIA




Diretor da Unidade:

Sano-Martins, Ida Sigueko PhD PqC VI




Pesquisadores da Unidade:

Cury, Yara PhD PqC VI   

Giorgi, Renata PhD PqC IV    

Gonçalves, Luís Roberto de Camargo PhD PqC IV    

Picolo, Gisele, PhD PqC I

Sampaio, Sandra Coccuzzo, MSc PqC I

Santoro, Marcelo Larami PhD PqC IV   

Sousa e Silva, Maria Cristina Cirillo PhD PqC IV   

Spadacci-Morena, Diva Denelle, MSc PqC III    

Tanaka-Azevedo, Anita Mitico, PhD PqC III

Tomy, Sandra Corrallo PqC III




Linhas de Pesquisa Atuais:

Fisiopatologia das reações sistêmicas induzidas por toxinas animais: Caracterização biológica e bioquímica das toxinas; purificação e caracterização molecular de algumas substâncias que induzem distúrbios hemostáticos.

O Laboratório de Fisiopatologia tem como objetivo a caracterização das várias atividades dos venenos animais, investigando a ação dos venenos brutos e suas frações, principalmente aquelas com ação na hemostasia (pró-coagulante e anticoagulante, fibrinolítica, pró-agregante e antiagregante plaquetária); na hemólise e na prenhez de camundongos. A descrição de como ocorrem os envenenamentos, tanto experimental quanto acidental, bem como a causa dos distúrbios hemostáticos, podem prover dados para a caracterização dos venenos. Por outro lado, a caracterização dos venenos animais e suas frações pode fornecer informações adicionais para uma melhor compreensão e tratamento dos envenenamentos. Ainda, estes estudos possibilitam a descoberta de novos compostos fibrinolíticos, antitrombóticos ou anticoagulantes, apontando para um possível uso terapêutico desses componentes. Além disso, tem sido estudada a eficácia da soroterapia, em modelos animais ou em envenenamentos acidentais humanos, avaliando-se a evolução clínica e laboratorial dos indivíduos, a fim de melhorar o tratamento soroterápico em diferentes regiões do país.

Publicações:

RAMOS, A.T.; GONÇALVES, L.R.C.; RIBEIRO, O.G.; CAMPOS, A.C.R.; SANT'ANNA, O.A. Effects of Lonomia obliqua (lepidoptera, saturniidae) toxin on clotting, inflammatory and antibody responsiveness in genetically selected lines of mice. Toxicon, 43: 761-768, 2004.

SANTORO, M.L. & SANO-MARTINS, I.S. Platelet Dysfuncion during Bothrops jararaca snake envenomation in rabbits. Thrombosis and Haemostasis 92 (2): 369-383, 2004.

SANTORO, M.L.; BARBARO, K.C.; DA ROCHA, T.R.F.; TORQUATO, R.J.S.; HIRATA, I.Y.; SANO-MARTINS, I.S. Simultaneous isolation of platelet factor 4 and glycoprotein IIb-IIIa complex from rabbit platelets, and characterization of specific chicken antibodies to assay them. Journal of Immunological Methods, 284(1-2):55-72, 2004.

PARDAL, PPO SOUZA, SM; MONTEIRO, MRCC; FAN, HW; CARDOSO, JLC; FRANÇA, FOS; TOMY, SC; SANO-MARTINS,IS; et al.' Clinical trial of two antivenoms for the treatment of Bothrops and Lachesis bites in the north-eastern Amazon region of Brazil'. Trans. Royal S. of Trop. Med. and Hyg. 98: 28-42, 2004

FRANÇA FOS, BARBARO KC, FAN HW, CARDOSO JLC, SANO-MARTINS IS; TOMY SC, LOPES MH, WARRELL DA, THEAKSTON RDG & BAVSA. Envenoming by Bothrops jararaca in Brazil: association between venom antigenaemia and severity on admission to hospital'. Trans. R. S. of Trop. Med. and Hyg. 97: 312-317, 2003

SANO-MARTINS, I.S., SANTORO, M.L. Distúrbios hemostáticos em envenenamentos por animais peçonhentos no Brasil. In: Animais peçonhentos no Brasil. 1 ed. São Paulo: Sarvier, 2003, p. 289-309.

BATTELLINO, C.; PIAZZA, R.; Da SILVA, A.M.; CURY, Y.; FARSKY, S.H. Assessment of efficacy of bothropic antivenom therapy on microcirculatory effects induced by Bothrops jararaca snake venom. Toxicon, 41 (5): 583-593, 2003.

SEIBERT, CS; SHINOHARA, EMG; SANO-MARTINS, IS. In vitro hemolytic activity of Lonomia obliqua caterpillar bristle extract on human and Wistar rat erythrocytes. Toxicon, 41:831-839, 2003.

SOUSA-E-SILVA, M.C.C.; TOMY, S.C.; TAVARES, F.L.; NAVAJAS, L.C.; LARSSON, M.H.M.A.; LUCAS, S.R.R.; KOGIKA, M.M.; SANO-MARTINS, I. S. Hematological hemostatic and clinical chemistry disturbances induced by Crotalus durissus terrificus snake venom in dogs. Human and Experimental Toxicology 22: 491-500, 2003

MORAES, F.V.; SOUSA-E-SILVA, M.C.C.; BARBARO, K.C.; LEITÃO, M.A.; FURTADO, M.F. Biological and immunochemical characterization of Micrurus altirostris venom and serum neutralization of its toxic activities. Toxicon 41: 71-79, 2003.

ROCHA-CAMPOS, A.C.M.; GONÇALVES, L.R.C.; HIGASHI, H.G.; YAMAGUSHI, I.K.; FERNANDES, I.; OLIVEIRA, J.E.; RIBELA, M.T.C.P.; SOUSA E SILVA, M.C.C.; DIAS DA SILVA, W. Specific heterologous F(ab´)2 antibodies revert blood incoagulability resulting from envenoming by Lonomia obliqua caterpillars. American Journal of Tropical Medicine and Hygiene 64(5-6): 283-289, 2001.

SANO-MARTINS, I.S.; TOMY, S.C.; CAMPOLINA, D.; DIAS, M.B.; DE CASTRO, S.C.; DE SOUSA-E-SILVA, M.C.C.; AMARAL, C.F.; REZENDE, N.A.; KAMIGUTI, A.S.; WARRELL, D.A.; THEAKSTON, R.D.G. Coagulopathy following lethal and non-lethal envenoming of humans by the South American rattlesnake (Crotalus durissus) in Brazil. Quaterly J. Medicine 94(10): 551-559, 2001

REIS, C.V.; FARSKY, S.H.P.; FERNANDES, B.L.; SANTORO, M.L.; OLIVA, M.L.V.; MARIANO, M.; CHUDZINSKI-TAVASSI, A.M. In vivo characterization of Lopap, a prothrombin activator serine protease from the Lonomia obliqua caterpillar venom. Thrombosis Research, 102(5): 437-443, 2001.

SPADACCI-MORENA, D.D.; KATZ, S.G. Acute food restriction increases collagen breakdown and phagocytosis by mature decidual cells of mice. Tissue and Cell 33(3): 249-257, 2001.

FERNANDES, I.; TAVARES, F.L.; SANO-MARTINS, I.S.; TAKEHARA, H.A. Efficacy of bothropic antivenom and its IgG(T) fraction in restoring fibrinogen levels of Bothrops jararaca envenomed mice. Toxicon, 38: 995-998, 2000.

Fisiopatologia das lesões locais induzidas por toxinas animais.

O Laboratório de Fisiopatologia tem realizado estudos para melhor compreender, de uma maneira geral, as lesões locais induzidas por venenos animais. Desta forma, vêm sendo realizadas investigações que caracterizam a atividade hemorrágica e edematogênica dos venenos de serpentes Bothrops , bem como estudos sobre a resposta inflamatória, a qual é observada em pacientes envenenados por essas serpentes. Em complementação aos estudos de injúria local causada por venenos, pesquisas estão sendo feitas sobre as atividades antiinflamatória do veneno da serpente Crotalus durissus terrificus .
Os projetos acima citados têm como objetivos:
a) a caracterização dos mecanismos envolvidos na injúria local induzidas por venenos; esse estudo assume importância, desde que o soro não neutraliza com eficácia os efeitos locais produzidos durante o envenenamento.
b) a avaliação dos inibidores de proteases endógenos nesses efeitos.
c) usar os venenos brutos ou seus componentes isolados como ferramentas para investigar os processos hemorrágicos, bem como os mecanismos celulares e vasculares envolvidos no processo inflamatório.
Os estudos destes parâmetros acima citados poderão contribuir para o desenvolvimento de terapias complementares à soroterapia;

Publicações:

GONÇALVES, L.R.C.; CHUDZINSKI-TAVASSI, A.M. High molecular mass kininogen inhibits metalloproteinases of Bothrops jararaca snake venom. Biochemical and Biophysical Research Communications, 318: 53-59, 2004

SAMPAIO, S.C.; BRIGATTE, P.; SOUSA-E-SILVA, M.C.C.; Dos-SANTOS, E.C.; RANGEL-SANTOS, A.C.; CURI, R.; CURY, Y. Contribution of crotoxin for the inhibitory effect of Crotalus durissus terrificus snake venom on macrophage function. Toxicon 41: 899-907, 2003.

SAMPAIO, S.C.; SOUSA-E-SILVA, M.C.C.; BORELLI, P.; CURI, R.; CURY, Y. Crotalus durissus terrificus snake venom regulates macrophage metabolism and function. J. Leukoc. Biol. 70(4): 551-558, 2001.

GONÇALVES, L.R.C.; MARIANO, M. Local haemorrhage induced by Bothrops jararaca venom: relationship to neurogenic inflammation. Mediators of Inflammation, 9(2): 101-107, 2000.

FARSKY, S.H.P.; GONÇALVES, L.R.C.; GUTIÉRREZ, J.M.; CORREA, A.P.; RUCAVADO, A.; GASQUE, P.; TAMBOURGI, D.V. Bothrops asper snake venom and its metalloproteinase BaP-1 activate the complement system. Role in leukocyte recruitment. Mediators of Inflammation 9: 213-221, 2000.

Fisiopatologia da dor.

Dentre as linhas de pesquisa desse laboratório, tem-se desenvolvido projetos que visam caracterizar os mecanismos envolvidos na gênese da dor inflamatória, bem como o controle intrínseco deste fenômeno. Os objetivos desta linha de pesquisa são:
a) avaliar a participação de enzimas proteolíticas no desenvolvimento da hiperalgesia durante o processo inflamatório, para melhor se compreender a origem da resposta dolorosa na inflamação;
b) estudar a participação do neutrófilo, via liberação da proteína ligante de cálcio MRP-14 (S100A9), no controle da dor inflamatória, a fim de se determinar alguns dos mecanismos intrínsecos responsáveis pela regulação da hiperalgesia inflamatória;
c) determinar o efeito antinociceptivo e antiinflamatório de um peptídeo sintético homólogo à posição C-terminal da MRP-14 (S100A9) murina, como ferramenta para a criação de novas drogas analgésicas e antiinflamatórias.
d) investigar os mecanismos envolvidos na gênese da dor induzida por venenos/toxinas animais (serpentes Bothrops ; aranha Phoneutria nigriventer ; toxinas com atividade fosfolipase A2).
e) avaliar novas abordagens para o tratamento da dor por toxinas animais (veneno de Crotalus durissus terrificus ).

Publicações:

DALE, C.S.; GONÇALVES, L.R.C.; JULIANO, L.; JULIANO, M.A.; MOURA DA SILVA, A.M.; GIORGI, R. The C-terminus of murine S100A9 inhibits hyperalgesia and edema induced by jararhagin. Peptides, 25: 81-89, 2004.

ZANCHET, E. M., LONGO, I., CURY, Y. Involvement of spinal neurokinins, excitatory amino acids, proinflammatory cytokines, nitric oxide and prostanoids in pain facilitation induced by Phoneutria nigriventer spider venom. Brain Research.1021(1), 101 - 111, 2004.

PICOLO, G., CURY, Y. Peripheral neuronal nitric oxyde synthase activity mediates the antinociceptive effect of Crotalus durissus terrificus snake venom, a delta- and kappa opioid receptor agonist. Life Sciences75(5) 559 - 573, 2004.

CHACUR, M., GUTIERREZ, J. M., MILLIGAN, E. D., WIESELERFRANK, J., BRITTO, L., MAIER, S. F., WATKINS, L. R., CURY, Y. Snake venom components enhance pain upon subcutaneous injection: an initial examination of spinal cord mediators. Pain. 111(1-2) .65 - 76, 2004.

CHACUR, M., MILLIGAN, E. D., SLOAN, E., WIESELERFRANK, J., BARRIENTOS, R., MARTIN, D., POOLE, S., LOMONTE, B., GUTIÉRREZ, J., MAIER, S., CURY, Y., WATKINS, L. Snake venom phospholipase A2s (Asp49 and Lys49) induced mechanical allodynia upon pei-sciatic administration: involvement of spinal cord proinflammatory cytokines and nitric oxide. Pain 108(1), 180 - 191, 2004.

PICOLO, G.; CASSOLA, A.C.; CURY, Y. Activation of peripheral ATP-sensitive K+ channels mediates the antinociceptive effect of Crotalus durissus terrificus snake venom. Eur. J. Pharmacol., 469 (1-3): 57-64, 2003.

CHACUR, M.; LONGO, I.; PICOLO, G.; GUTIÉRREZ, J.M.; LOMONTE, B.; TEIXEIRA, C.F.P.; CURY, Y. Hyperalgesia induced by Asp49 and Lys49 phospholipases A2 from Bothrops asper snake venom: Pharmacological mediation and molecular determinants. Toxicon, 41 (6): 667-678, 2003.

ZANCHETI, E.M. and CURY, Y. Peripheral tackykinin and excitatory amino acid receptors mediate hyperalgesia induced by Phoneutria nigriventer venom. Eur. J. Pharmacol., 467 (1-3): 111-118, 2003.

PAGANO, R.L.; AMORIM DIAS, A.; DALE, C.S.; GIORGI, R. Neutrophils and the calcium-binding protein MRP-14 mediate carrageenan-induced antinociception in mice. Mediators of Inflammation, v. 11, 203- 210, 2002.

CHACUR, M.; PICOLO, G.; TEIXEIRA, C.F.P.; CURY, Y. Bradykinin is involved in hyperalgesia induced by Bothrops jararaca venom. Toxicon, v.40, 1047-1052, 2002.

PICOLO, G.; CHACUR, M.; GUTIÉRREZ, J. M.; TEIXEIRA, C. F. P; CURY, Y. Evaluation of the ability of two antivenoms to neutralise hyperalgesia induced by Bothrops jararaca and Bothrops asper snake venoms. Braz J Med Biol Res, v. 35, 1221-1228, 2002.

CHACUR, M.; PICOLO, G.; GUTIÉRREZ, J.M.; TEIXEIRA, C.F.P.; CURY, Y. Pharmacological modulation of hyperalgesia induced by Bothrops asper (terciopelo) snake venom. Toxicon, 39(8): 1173-1181, 2001.

BRIGATTE, P.; HOFFMANN, F.A.; BERNARDI, M.M.; GIORGI, R.; FERNANDES, I.; TAKEHARA, H.A.; BARROS, S.B.M.; ALMEIDA, M.G.; CURY, Y. Tolerance to the antinociceptive effect of Crotalus durissus terrificus snake venom in mice is mediated by pharmacodynamic mechanisms. Toxicon, 39(9): 1399-1410, 2001.

PICOLO, G.; GIORGI, R.; CURY, Y. Delta-Opioid receptors and nitric oxide mediate the analgesic effect of Crotalus durissus terrificus snake venom. European Journal of Pharmacology, 391: 55-62, 2000.

Hematologia comparativa

O objetivo dessa linha de pesquisa é estudar o sistema hemostático e a morfofisiologia das células sanguíneas de répteis (serpentes) e anfíbios. As células do sangue circulante e a hematopoese de algumas espécies de serpentes tem sido estudada, além do isolamento e caracterização de uma proteína plasmática inibidora da atividade coagulante da trombina (Bothrops jararaca).

Publicações:
TANAKA-AZEVEDO, AM; TORQUATO, RJS; TANAKA, AS; SANO-MARTINS,IS. Characterization of Bothrops jararaca coagulation inhibitor (BjI) and presence of similar protein in plasma of other animals. Toxicon 44: 289-294, 2004

TANAKA-AZEVEDO, AM; TANAKA,AS and SANO-MARTINS, IS. A new blood coagulation inhibitor from the snake Bothrops jararaca plasma: isolation and characterization. Biochemical and Biophysical Communications 308: 706-712, 2003.

SANO-MARTINS, I.S.; DABROWSKI, Z.; TABAROWSKI, Z.; WITKOWSKA-PELC, E.; SPADACCI-MORENA, D.D.; SPODARYK, K. Hematopoiesis and a new mechanism for the release of mature blood cells from the boné marrow into the circulation in snakes (Ophidia). Cell and Tissue Research, v. 310, 67-75, 2002.

DABROWSKI, Z.; TABAROWSKI, Z.; SANO-MARTINS, I.S.; SPADACCI-MORENA, D.D.; WITKOWSKA-PELC, E.; KRZYSZTOFOWICZ, E.; SPODARYK, K. Hematopoiesis in snakes (Ophidia). Folia Histochemica et Cytobiologica, v. 40, 219-220, 2002.