Instituto Butantan

LABORATÓRIO DE DESENVOLVIMENTO DE PROCESSOS
"CENTRO DE BIOTECNOLOGIA"

Chefe da Unidade:

Liderança Científica:

Objetivo Geral da Unidade

O Centro de Biotecnologia foi criado em 1985 em resposta ao "Plano de Auto-Suficiência em Imunobiológicos" do Ministério da Saúde.

Em colaboração com a Divisão de Produção, novas plantas de produção foram estabelecidas e soros anti-venenos hiperimunes foram produzidos com padrões internacionais de qualidade. Novos projetos foram criados e resultaram na produção e desenvolvimento de: 1) anticorpos monoclonais anti-CD3 produzidos por cultura de células de mamífero e testados com sucesso em casos clínicos de rejeição de tecido transplantado; 2) albumina humana derivada da placenta em escala piloto.

A purificação de outras proteínas a partir de placentas humanas também foi obtida; 3) uma nova vacina pertussis acelular utilizando uma metodologia simples e efetiva que pode ser acoplada ao processo de produção da vacina de pertussis celular convencional; 4) vesículas da membrana externa (OMV) purificadas de culturas de meningococos crescidas em fermentador de até 60 L para o desenvolvimento da vacina de meningite B/C; 5) vacina recombinante contra a hepatite B (representa um dos produtos mais importantes e de alto impacto na saúde pública do País desenvolvido pelo Instituto Butantan); 6) eritropoetina recombinante produzida por cultura de células de mamífero que também representa um produto desenvolvido pelo Centro de Biotecnologia de alto impacto em saúde pública; 7) surfactante pulmonar suíno produzido por uma tecnologia inovadora e que irá diminuir a mortalidade de neonatos e sequelas ocasionadas por nascimentos de prematuros.

Outros projetos foram estabelecidos para o desenvolvimento de vacinas baseadas no uso de polisacarídeos, por exemplo, contra Haemophilus influenzae e Streptococcus pneumoniae. Novos veículos para a liberação controlada de antígenos, drogas e genes usando lipossomos e microesferas estão sendo investigadas.

O Centro de Biotecnologia se prepara para os desafios do futuro desenvolvendo paralelamente projetos de pesquisa básica. As ferramentas de biologia molecular têm sido a base desses projetos, como no desenvolvimento de vacinas e biofármacos recombinantes produzidos em E. coli e BCG.

O Centro de Biotecnologia contribuiu no sequenciamento do primeiro genoma de um patógeno de planta, a bactéria Xylella fastidiosa, e também, na descrição do transcriptoma humano. Com a experiência adquirida nesses projetos, o Centro de Biotecnologia está atualmente sequenciando o genoma de patógenos de interesse em saúde pública, objetivando o desenvolvimento de novas vacinas recombinantes de subunidades. O Dr. Isaías Raw é a Liderança Científica do Centro de Biotecnologia desde a sua formação e foi também o seu Diretor até 1997.

O Centro foi dirigido pela Dra. Ana Maria Moro de 1997 até 2001. Como resultado das inovações e produtos obtidos pelo Centro de Biotecnologia, principalmente aqueles relacionados aos biofármacos produzidos pela tecnologia de cultura de células de mamífero em alta densidade, um novo Laboratório foi criado (Laboratório Especial de Biofármacos em Célula Animal), sob a direção da Dra. Ana Maria Moro. O Centro de Biotecnologia está atualmente sob a direção do Dr. Paulo Lee Ho.

Linhas de Pesquisa Atuais

Vacinas contra Pertussis e Adjuvantes

Pesquisadores da Unidade:

Dias, Waldely de Oliveira PhD PqC IV

Ferreira, Vera Regina Farago MsC PqC II

Gebara, Vera Cristina Bugelli Cainelli PhD PqC III

Horton, Denise Silvia Piccini Quintas PhD PqC III

Liberman, Célia MsC PqC IV

Uma vacina pertussis acelular foi obtida de filtrado de cultivo Bordetella pertussis, um subproduto na produção da vacina pertussis celular tradicional. Foi avaliada a resposta imune humoral e celular em camundongos, induzida por preparações de vacina pertussis acelular, usando diferentes adjuvantes: hidróxido de alumínio, vitamina-A, frações solúveis de B.pertussis e surfactante pulmonar. Os resultados obtidos com os adjuvantes testados se mostraram promissores, comparativamente ao hidróxido de alumínio.

Publicações

Oliveira, J.S.; Prieto da Silva, A.R.B.; Soares, M.B.; Stephano, M.A.; Dias, W.O.; Raw, I. & Ho P.L. (2000) Cloning and charactherization of an a-neurotoxin-type protein specific for the coral snake Micrurus corallinus. Biochem. Biophys. Res. Comm.267:887-891.

Nascimento, I.P.; Dias, W.O.; Mazzantini, R.P.; Miyaji, E.N.; Gamberini, M.; Quintilio, W.; Gebara, V.C.; Cardoso, D.F.; Ho, P.L.; Raw, I.; Winter, N.; Gicquei, B.; Rappuoli, R. & Leite, L.C.C. (2000) Recombinant Mycobacterium bovis BCG expressing pertussis toxin subunit S1 induces protection against an intracerebral challenge with live Bordetella pertussis in mice. Infect. Immun. 68: 4877- 4883.

Miyaji, E. N.; Mazzantini, R.P.; Dias, W.O.; Nascimento, A.L.T.O.; Marcovistz, R.; Matos, D.S.; Raw, I.; Winter, N.; Gicquel, B.; Rappuolli, R. & Leite, L.C.C.(200) Induction of neutralizing antibodies against diphtheria toxin by priming with recombinant Mycobacterium bovis BCG expressing CRM197, a mutant diphtheria toxin. Infect. Immun. 69 (2), 869-874.

Dias, W.O.; Mazzantini, R.P.; Miyaji, E.N.; Nascimento, I.P.; Horton, D.S.P.Q. & Leite, L.C.C. (2000) Resposta imune induzida por vacinas de BCG recombinante-DTP . Biotecnologia Ciência e Desenvolvimento 17: 24-28

Miyaji, E. N.; Mazzantini, R.P.; Dias, W.O.; Nascimento, A.L.T.O.; Marcovistz, R.; Matos, D.S.; Raw, I.; Winter, N.; Gicquel, B.; Rappuolli, R. & Leite, L.C.C.(2001) Induction of neutralizing antibodies against diphtheria toxin by priming with recombinant Mycobacterium bovis BCG expressing CRM197, a mutant diphtheria toxin. Infect. Immun. 69 (2), 869-874.

Ramos, C.R.R., Vilar, M.M., Nascimento, A.L.T.O., Ho, P.L.., Thaumaturgo, N., Edelenyi, R., Almeida, M., Dias, W.O. and Tendler, M. (2001) r-Sm14 - pRSETA efficacy in experimetal animals. Mem. Inst. Oswaldo Cruz 96 suppl: 131-135

Polissacarídeo capsular e vacinas conjugadas

Pesquisadores da Unidade:

Gonçalves, Viviane Maimoni, PhD

Cabrera-Crespo, Joaquim, PhD

Lopes, Alexandre Yague, PhD

Leite, Luciana Cezar de Cerqueira PhD PqC VI

Ramos, Júlia Baruque PhD PqC III

Schenkman, Rocilda Perazzini Furtado PhD PqC III

Takagi, Mickie Chemist PqC II

Tanizaki, Martha Massako PhD PqC VI

Ueda, Celina Maria Pompeo Mome Biomedical PqC III

Almeida, Maria Elisabete Sbrogio de MsC PqCIII

Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae e Streptococcus pneumoniae são bactéria patogênicas encapsuladas de interesse em saúde pública no Brasil. Essas bactérias são causadoras de meningite, septicemia e pneumonia (S.pneumoniae). A forma mais efetiva de prevenção é por meio de vacinas. O antígeno mais eficaz para o uso em vacina é o polissacarídeo capsular conjugado a uma proteína carregadora. O Centro de Biotecnologia vem realizando estudos visando o desenvolvimento de vacinas contra esses patógenos.

Os dois sorogrupos da N. meningitidis prevalentes no Brasil são o B e C. O polissacarídeo capsular do sorogrupo B não é imunogenico, portanto o antígeno para o sorogrupo B são proteínas de mambrana na forma de vesículas de membrana externa (OMV). O Centro de Biotecnologia tem dois projeto de vacinas anti-meningocócica. O primeiro contra a sorogrupo B será composta de OMV duascepas prevalentes no Brasil. Este projeto em associação com o Instituto Adolfo Lutz e FIOCRUZ está em fase de estudos clínicos. O segundo, será para os sorogrupos B/C, onde o polissacarídeo sorogrupo C será conjugado a OMV.

Uma vacina de polissacarídeo conjugada anti-pneumocócica terá que incluir entre 12 a 23 diferentes polissacarídeos, isolada de cepas patogênicas. Pretende-se diminuir o número destes polissacarídeos, conjugando-as com uma proteína de membrana do pneumococo que seja conservada e capaz de induzir antígenos protetores.

Publicações:

Baruque-Ramos, J.; Hiss, H.; Vicentin, M.A.; Paz, M.F.; Peixoto, A.; Leal, M.B.B.; Sato, R.A.; Vassoler, U.M.; Raw, I. Nitrogen consumption during batch cultivation of Neisseria meningitidis (serogroup C) in Frantz medium. Braz. J. Microbiology, 32: 305-310, 2001.

FERRER-MIRALLES N., FELIU J. X., VANDEVUER S., MÜLLER A., CABRERA-CRESPO J., ORTMANS I., HOFFMANN F., CAZORLA D., RINAS U., PRÉVOST M. AND VILLAVERDE A. "Engineering regulable Escherichia coli ß-galactosidases as biosensors for anti-HIV antibody detection in human sera". J. Biol. Chem. 276 (43), 40087-40095, 2001.

SBROGIO-ALMEIDA, M.E., FERREIRA, L.C.S. Flagellin expressed by live
Salmonella vaccine strains induces distinct antibody responses following
delivery via systemic or mucosal immunization in routes. FEMS Imunnol. Med.
Microbiol., 30: 203-208, 2001.

Patentes

Pending patente in Spain (2000) Proc. No. 200003073. "Proteína recombinante para el diagnostico del Sindrome de Inmunodeficiencia Adquirida SIDA". Inventores Neus Ferrer-Miralles, Jordi X. Feliu, Antonio Villaverde, Ursula Rinas, Annette Müller and Joaquin Cabrera-Crespo. Depositante Universitat Autonoma de Barcelona. Oficina Espanhola de Patentes y Marcas, Espanha.

Liberação controlada de imunógenos e drogas
Microesferas e Lipossomos

Pesquisadores da Unidade

Costa, Maria Helena Bueno da PhD PqC IV

Esteves, Maria Izabel Biologist PqC III,

Quintilio, Wagner Ms PqCII

Neste grupo estudam-se sistemas de veiculação de drogas, tais como nanopartículas, lipossomos, produzidos com reagentes biodegradáveis- usados para o controle, no tempo e no espaço, dos efeitos terapêuticos de drogas, genes, oligonucleotídeos e vacinas nas saúdes humanas e animal. O objetivo de se usar sistema particulado em saúde humana também é o de se prolongar a duração da ação de um princípio ativo, minimizar reações adversas ou maximizar a eficácia. Estes objetivos podem ser atingidos controlando-se a difusão do encapsulado, as velocidades de reações, ou outros parâmetros físico-químicos através do uso de materiais controladores de velocidade de difusão ou reação ou ainda manipulando-se o destino do agente para que ele vença barreiras.

As principais moléculas que têm sido microencapsuladas neste laboratório são a proteína carregadora de baixos imunógenos a hsp-18, os toxoides tetânico e diftérico separados ou juntos, o polissacarídeo C de Neisseria meningitides, oligonucleotídeos (poli-CG e anti ACTH) e venenos animais. Os aspectos físico-químicos dos processos de formulações nos diversos veículos são monitorados por métodos físicos, químicos e imunológicos. Contamos com colaboradores do I. Butantan, IQ-USP, EPM, UNICAMP, LNS (Brasil), Paul Scherrer Institut (Suíça), Université Paris XI, Université Paris VI (França), e London University (Inglaterra).

Publicações

BLANC, I.; COSTA, J.B. & CHAZALET, M.S.P. Oligonucletotide delivery by a cationic derivative of the polyene antibiotic amphotericin B. I. Interaction oligonucletide/vector as studied by optical spectroscopy and electron microscopy. Biochim. Biophys. Acta., 1464: 299- 308, 2000.

ESTEVES, M.I.; QUINTILIO, W.; SATO, R.A.; RAW, I. SOARES DE ARAUJO, P. & COSTA, M.H.B. The stabilisation of immunoconjugates by trehalose. Biotech. Letters, 22: 417- 420, 2000.

QUINTILIO, W.; SATO, R.A.; SANT'ANNA, A.O.; ESTEVES, M.I.; SESSO, A.; SOARES DE ARAUJO, P. & COSTA, M.H.B. Large unilamellar vesicles as trehalose-stabilised vehicles for vaccines: storage time and in vivo studies, J. Control. Release, 67: 409- 413, 2000.

COSTA, M.H.B. & FATTAL, E. Comparative study of the systemic immune response against a Heat shock protein associated to different delivery systems, J. Control. Rel., Proc. Symp. Control. Rel. Bioact. Mater.,# 6707.2000.

Biofármacos purificados

Pesquisadores da Unidade

Flávia Saldanha Kubrusly - PhD, PqC-IV,

Elisabeth Cheng, PhD

Elizabeth A. L. Martins - PhD PqCV

Anita Mitico Tanaka - mestre, PqC-II,

Surfactante Pulmonar de origem suína: um surfactante pulmonar natural foi obtido a partir de pulmões suínos por tecnologia original e escalonável. A terapia com surfactante é um tratamento auxiliar eficaz não somente no tratamento de neonatos prematuros como também em distúrbios respiratórios de crianças e adultos.

A avaliação pré-clínica desta nova preparação usando o modelo biológico de coelhos neonatos prematuros mostrou os resultados esperados em termos do aumento da complacência pulmonar e do decréscimo da pressão ventilatória. Estes resultados levaram a formação do grupo multicêntrico que coordenará os estudos comparativos desta preparação com preparados comerciais já em uso corrente para avaliação de sua eficácia clínica em humanos. Outros estudos visando o aprimoramento da preparação através da adição de suas proteínas hidrofílicas (principalmente, SP-A) e de proteínas antioxidantes estão em andamento. O uso desta preparação como adjuvante de diferentes antígenos candidatos vacinais está em teste com resultados promissores. Atividade antiinflamatória tem sido observada com o uso da preparação pela inibição das fosfolipases secretórias.

Hemoderivados - Cromatografia direta para purificação do fator VIII - A maioria dos hemoderivados (albumina, imunoglobulina e fatores de coagulação) usados na terapia clínica no Brasil são importados. Pesquisadores do grupo desenvolvimento de processos industriais estão trabalhando no desenvolvimento de uma nova metodologia de obtenção do fator VIII por cromatografia direta de plasma humano e suíno. O processo permite o aproveitamento do plasma humano residual para a purificação da albumina e imunoglobulinas. Diferentes resinas, aniônicas e de gel filtração estão sendo testadas para o aprimorar a purificação e melhorar o rendimento dos produtos. Também estão sendo testados diferentes estabilizantes e diversos protocolos para garantir desinfecção viral e esterilidade durante a purificação e estocagem.

Inibidor de trombina obtido de Bothrops jararaca: A trombina é a enzima chave da coagulação sanguínea. Ela controla não somente a produção de fibrina a partir do fibrinogênio como também, sua ativação pela proteólise de outros fatores como o fator V e VIII. Existe um grande interesse na obtenção de um inibidor natural desta enzima. Assim, um inibidor natural da enzima foi isolado do sangue da serpente Bothrops jararaca. Apesar deste inibidor apresentar duas cadeias de 109 e 138 kDa por SDS/PAGE em condições redutoras seu peso molecular em condições nativas é maior que 1000 kDa sugerindo que estas cadeias estão fracamente ligadas. Este inibidor tem uma atividade específica na coagulação da trombina, não interferindo nas outras funções desta enzima como agregação plaquetária ou atividade amidolítica.
Suporte FAPESP, PRONEX, CAPES

Publicações

Kubrusly FS, Netto SL, Iourtov D, Raw I, de Araujo PS A natural surfactant from pig lungs. Biotech. Letters, 22: 1251-11253, 2000.

Cianciarullo AM, Leme E, Beçak W, Raw I, Kubrusly FS Ultrastructural chemical reaction to detect saturated phospholipids of a natural surfactant from pig lungs. Biotech. Letters, 23: 1293-1296, 2001.

M. Dametto, A.P. David, S.S. Azzolini, I.T.N. Campos, A.M. Tanaka, A. Gomes, R. Andreotti and A.S., Tanaka Purification and Characterization of a Trypsin-like Enzyme with Fibrinolytic Activity Present in the Abdomen of Horn Fly, Haematobia irritans irritans (Diptera: Muscidae), Journal of Protein Chemistry:, Vol. 19 (6), 515-521, 2000.

Grellet S.; Martins, E.A.L.; Gonçalvez, V. M.; Lopes, A.P.Y.; Raw, I. Cabrera-Crespo, J. An associated process for the purification of immun-globulin G, catalase, superoxide dismutase and albumin from haemolysed human placenta blood. Biotechnol. Appl. Biochem. 34: 135-142, 2001.

CABRERA-CRESPO J., GONÇALVES V. M., MARTINS E.A.L., GRELLET S., LOPES A. P. Y. AND I. RAW. "Albumin purification from human placenta" Biotechnol. Appl. Biochem. 31: 101-106, 2000.

TANAKA A. M., TANAKA A. S., LOPES A. P. Y., TAKAGI M., CABRERA-CRESPO J. AND I. RAW "Purification of porcine factor VIII using chromatographic methods". Biotechnol. Lett. 22: 257-260, 2000.

Biotecnologia molecular

Pesquisadores da Unidade:

Angela Silva Barbosa, PhD, PqC III

Abreu, Patrícia Antônia Estima MsC PqC II

Eliane Namie Miyaji, PhD, PqC III

Inácio de Loiola Meirelles Junqueira de Azevedo, PhD, PqC I

Maria Leonor Sarno de Oliveira , PhD, PqC I

Martins, Elizabeth Angélica Leme Ph.D. PqC V

Nascimento, Ana Lúcia Tabet Oller do Ph.D. PqC VI

Ho, Paulo Lee PhD PqC V

Ioshimoto, Luzia Mitie MsC PqC III

Leite, Luciana Cezar de Cerqueira PhD PqC V

Prieto da Silva, Álvaro Rossan de Brandão Veterinary PqC I

O laboratório é dedicado à expressão de genes heterólogos numa variedade de sistemas de apresentação para o desenvolvimento de vacinas recombinantes ou biofármacos. A expressão de toxinas de veneno potenciais e proteínas com atividade farmacêutica estão sendo investigadas. Neste sentido, cDNA codificando para toxinas de Micrurus coralinus e Bothops insularis, bem como HMG-1 de rato e FGF-2 humano foram clonados expressos e purificados. Suas atividades biológicas estão sendo caracterizadas.

O gene de interferon- alfa humano foi sintetizado, clonado em vetores de expressão em E.coli e está sendo purificado. Diferentes antígenos vacinais estão sendo investigados, entre eles:Fragmento C da toxina tetânica (FC), Sm14 de Schistosoma mansoni, subunidade S1 da toxina pertussis (em fusão ou não com FC para melhorar a imunogenicidade), domínio de ligação a heparina do FHA de B. pertussis, subunidade B da toxina colérica, antígenos de S. pneumoniae, PsaA e PspA, todos clonados, expressos, purificados e suas propriedades imunogênicas estão sendo caracterizadas. A expressão de antígenos heterólogos em cepas vacinais de Salmonella typhimurium sob controle do regulon de estresse oxidativo, soxRS, SoxR e soxS estão sob investigação; como controle, FC está sendo utilizado. O Centro deu suporte ao desenvolvimento daprodução da vacina de Hepatite B, em que HBsAg é expresso em Ransenula.

O potencial de BCG recombinante como vetor vivo de apresentação de antígeno tem sido investigado. Antígenos para DPT, S. pneumoniae e S.mansoni foram clonados em vetores de expressão e expressos em rBCG, demonstrando a indução de resposta imune humoral e celular. Animais imunizados foram desafiados com os respectivos patógenos demonstrando proteção em alguns casos.

Publicações

Junqueira de Azevedo, I.L.M., Prieto da Silva, A.R.B., Carmona, E. and Ho, P.L. (2001) Characterization of a Paramyxovirus from a Fer de Lance viper (Bothrops jararaca): partial nucleotide sequence of the putative fusion protein. Arch. Virol., 145: 1-7.

Prieto da Silva, A.R.B., Yamaguchi, Y.K., Morais, J.F., Higashi, H.G., Raw, I., Ho, P.L. and Oliveira, J.S. (2001) Cross reactivity of different specific Micrurus antivenom sera with homologous and heterologous snake venoms. Toxicon 39:949-953.

Oliveira, M.L.S., Coutinho, J.A., Krieger, J.E., Raw, I. and Ho, P.L. (2001) Site-directed mutagenesis of bovine FGF-2 cDNA allows the production of the human-form of FGF-2 in Escherichia coli. Biotechnol. Lett. 23: 1151-1157.

Molecular cloning and expression of a functional snake venom Vascular Endothelium Growth factor (svVEGF) from the Bothrops insularis pit viper. A new member of the VEGF family of proteins. J. Biol. Chem. 276: 39836-39842

Miyaji, E.N.; Mazzantini, R.P.; Dias, W.O.; Nascimento, A.L.T.O.; Marcovistz, R.; Matos, D.S.; Raw,I.; Winter, N.; Gicquel, B.; Rappuoli, R. and Leite, L.C.C. (2001) " Induction of neutralizing antibodies against diphteria toxin by priming with recombinant Mycobacterium bovis BCG expressing CRM 197, a mutant diphteria toxin". Infection and Immunity, 69:869-874.

Ramos, C.R.R.; Vilar, M.M.; Nascimento, A.L.T.O.; Ho; P.L.; Thaumaturgo, N.; Edelenyi, R.; Almeida,M.; Dias, W.O.; Diogo, C.M. and Tendler, M. (2001) "r-Sm14-pRSETA efficacy in experimental animals". Mem.Inst. Oswaldo Cruz, 96:131-135.

Nascimento, I.P., Dias, W.O., Mazzantini, R.P., Miyaji, E.N., Gamberini, M., Quintilio, W., Gebara, V.C., Cardoso, D.F., Ho, P.L., Raw, I. Winter, N., Gicquel, B., Rappuoli, R., Leite, L.C.C. "Recombinant BCG Expressing S1-Pertussis Toxin induces Protection against an Intracerebral Challenge with Live Bordetella pertussis in Mice", Infection Immunity, 68 (9), 4877-4883, 2000.

DIAS, W.O., MAZZANTINI, R.P., MIYAJI, E.N., NASCIMENTO, I.P., HORTON, D.S.P.Q, LEITE, L.C.C. "VACINAS DE BCG RECOMBINANTE-DTP", REVISTA DE BIOTECNOLOGIA 17, 24-28, 2000.

Miyaji, E.N., Mazzantini, R.P., Dias, W.O., Nascimento, A.L.T.O, Marcovistz, R., Matos, D.S., Raw, I., Winter, N., Gicquel, B., Rappuoli, R. and Leite, L.C.C. "Induction of Neutralizing Antibodies Against Diphtheria Toxin by Priming with Recombinant Mycobacterium bovis BCG Expressing CRM197, a Mutant Diphtheria Toxin", Infection and Immunity, 69 (2), 869-874, 2001.

Camargo, A.A. et al "The contribution of 700.000 'ORF sequence tags' to the definition of the human transcriptome" Proc. Natl. Acad. Sci. USA 98, 12103-12108, 2001.

Miyaji, E.N., Dias, W.O., Gamberini, M., Gebara, V.C.B.C., Schenkman, R.P.F., Wild, J., Riedl, P., Schirmbeck, R. and Leite, L.C.C. " PsaA (pneumococcal surface adhesin A) and PspA (pneumococcal surface protein A) DNA vaccines induce humoral and cellular immune response against Streptococcus pneumoniae" Vaccine, 20 (5-6), 805-812, 2001.

Patentes

Oliveira, M.L., Neto, J.C., Krieger, J.E., Ho, P.L. & Fundação Butantan (2001) Processo de humanização do DNA complementar (cDNA) do Fator de Crescimento de Fibroblasto-2 (FGF-2) bovino, seu produto expresso em Escherichia coli e uso terapêutico do referido produto. Pedido de privilégio, Processo INPI (PI) 0006798-9, RPI 1580 de 17/04/2001.

Genômica

Pesquisadores da Unidade

Ho, Paulo Lee PhD PqC V

Leite, Luciana Cezar de Cerqueira PhD PqC V

Martins, Elizabeth Angélica Leme Ph.D. PqC V

Nascimento, Ana Lúcia Tabet Oller do Ph.D. PqC VI

O grupo participou do Projeto Genoma da Xylella fastidiosa, que possibilitou o seqüenciamento do primeiro genoma de um fitopatógeno. O Projeto Genoma de Câncer Humano, financiado pela FAPESP e pelo Instituto Ludwig de Pesquisas sobre o Câncer, também contou com a participação do Centro de Biotecnologia como laboratório de seqüenciamento, contribuindo com 40.000 seqüências. Atualmente o grupo está participando do projeto Genoma de Schistosoma mansoni, e deverá contribuir com 30.000 seqüências.

Publicações

Simpson, A.J.G et al. "The genome sequence of the plant pathogen Xylella fastidiosa" Nature 406: 151-157, 2000.

de Souza et al, "Identification of human chromosome 22 transcribed sequences with ORF expressed sequence tags", Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97 (23), 12690-12693, 2000.

Camargo, A.A., et al, The contribution of 700,000 "ORF sequence tags" to the definition of the human transcriptome. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 98:12103-12108, 2001.

AREAS, A. P. M.; OLIVEIRA, M. L. S.; RAMOS, C. R. R.; SBROGIO-ALMEIDA, M. E.; RAW, I.; HO, P. L. Synthesis of cholera toxin B subunit gene: cloning and expression of a functional 6XHis-tagged protein in Escherichia coli. Protein Expres. Purif. v. 25, 481-487, 2002.

COSTA, M. H. B.; TANIZAKI, M. M.; QUINTÍLIO, W.; SANT'ANNA, O. A.; SCHWENDENER, R.; ARAÚJO, P. S. Heat Shock protein micro-encapsulation as a double tool for the improvment of new generation vaccines. J. Liposome Research, v. 12, 29-35, 2002.

DIAS, W. O.; HORTON, D. S. P. Q.; GEBARA, V. C. B. C.; FURUYAMA, N.; RISOLÉO, L.; FERREIRA, V. R. F.; RAW, I. Vitamin A as adjuvant to the mouse immune response to pertussis, tetanus and diphtheria vaccines. Biotechnology Letters, v. 24, 1515- 1518, 2002.

GONÇALVES, V. M.; ZANGIROLAMI, T. C.; GIORDANO, R. L. C.; RAW, I.; TANIZAKI, M. M.; GIORDANO, R. C. Optimization of medium and cultivation conditions for capsular polysaccharide production by Streptococcus pneumoniae serotype 23F. Appl. Microbiol. Biotechnol, v. 59, 713-717, 2002.

HO, P. L.; SERRANO, S. M. T.; CHUDZINSKI-TAVASSI, A. M.; MOURA DA SILVA, A. M.; MENTELE R.; CALDAS, C.; OLIVA, M. L. V.; BATISTA, I. F. C.; OLIVEIRA, M. L. S. Angiostatin-like molecules are generated by snake venom metalloproteinases. Biochem. Biophys. Res. Commun., v. 294, 879-885, 2002.

JUNQUEIRA DE AZEVEDO, I. L. M.; HO, P. L. A survey of gene expression and diversity in the venom glands of the pitviper snake Bothrops insularis through the generation of Expressed Sequence Tags (ESTs). Gene v. 299, 279-291, 2002.

QUINTILIO, W.; SANT'ANNA, O. A.; FALJONI-ALÁRIO, A.; ARAUJO, P. S.; COSTA, M. H. B. The use of protein structure/activity relationships for the rational design of stable particulate delivery systems. Braz. J. Med. Biol. Res., v. 35, 727- 730, 2002.

MIYAJI, E. N.; DIAS, W. O.; GAMBERINI, M.; GEBARA,V. C. B. C.; SCHENKMAN, R. P. F.; WILD, J.; RIEDL, P.; REIMANN, J.; SCHIRMBECK, R.; LEITE, L. C. C. PsaA (pneumococal surface adhesin A) and pspA (pneumococal surface protein A) DNA vaccines induce humoral and cellular immune responses against Streptococcus pneumoniae. Vaccine, v. 20, 805-812, 2002.

MIYAJI, E. N.; FERREIRA, D. M.; LOPES, A. P. Y.; BRANDILEONE, M. C. C.; DIAS, W. O.; LEITE, L. C. C. Analysis of serum cross-reactivity and cross-protection elicited by immunization with DNA vaccines against Streptococcus pnenumoniae expressing PspA fragments from different clades. Infec. Immun., v. 70, 5086-5090, 2002.

PEDROSA, M. F. F.; JUNQUEIRA DE AZEVEDO, I. L. M.; GONÇALVES DE ANDRADE, R. M.; VAN DEN BERG, C. W.; RAMOS, C. R. R.; HO, P. L.; TAMBOURGI, D. V. Molecular cloning and expression of a functional dermonecrotic and haemolytic factor from Loxosceles laeta venom. Biochem. Bioph. Res. Commun., v. 298, 638-645, 2002.

ROCHA, S. L.; LOMONTE, B.; NEVES-FERREIRA, A. G.; TRUGILHO, M. R.; JUNQUEIRA DE AZEVEDO, I. L. M.; HO, P. L.; DOMONT, G. B.; GUTIERREZ, J. M.; PERALES, J. Functional analysis of DM64, an antimyotoxic protein with immunoglobulin- like structure from Didelphis masurpialis serum. Eur. J. Biochem., v. 269, 6052-6062, 2002.

TOMITA, E. Y.; RAMOS, C. R. R.; NASCIMENTO, A. L. T. O.; HO, P. L. Isolation of genomic DNA from Pichia pastoris without hydrolases. Biotecnologia Aplicada v. 19, 167-168, 2002

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